摘要：［摘 要］目的 探究异甘草素（ＩＳＬ）对阿尔茨海默病（ＡＤ）学习记忆能力的影响及作用机制。方法 野生型 对照小鼠（ＷＴ组）、三转基因阿尔茨海默病小鼠（３×Ｔｇ组）、３×Ｔｇ＋低剂量 ＩＳＬ（ＩＬ组）、３×Ｔｇ＋高剂量 ＩＳＬ（ＩＨ 组）各 ８只，通过 Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫实验评估小鼠学习与记忆功能；网络药理学获取 ＩＳＬ和 ＡＤ的相关基因；免疫组化 检测小鼠脑组织 Ｔａｕ蛋白病理状况；分子对接技术评价 ＩＳＬ小分子与 ＮＯＤ样受体家族含 ｐｙｒｉｎ结构域蛋白 ３ （ＮＬＲＰ３）蛋白结合能力；蛋白免疫印记法检测小鼠海马体 ＮＬＲＰ３、半胱天冬氨酸蛋白酶 １（Ｃａｓｐａｓｅ１）、活化剪切 型半胱天冬氨酸蛋白酶１（ｃｌｅａｖｅｄＣａｓｐａｓｅ１）、白细胞介素１β（ＩＬ１β）、白细胞介素１８（ＩＬ１８）、苏氨酸 ２３１位点 磷酸化 Ｔａｕ蛋白（ｐＴａｕＴ２３１）、丝氨酸 ３９６位点磷酸化 Ｔａｕ蛋白（ｐＴａｕＳ３９６）、总 Ｔａｕ蛋白（Ｔａｕ５）蛋白表达水平。 结果 水迷宫实验显示，与 ３×Ｔｇ组相比，ＩＬ组和 ＩＨ组小鼠逃避潜伏期缩短（Ｐ＜００５），穿越平台次数与目标 象限游泳距离增加（Ｐ＜００５）；在机制层面，网络药理学预测 ＩＳＬ可通过调节炎症反应、调控 ＩＬ１β等促炎因子 干预 ＡＤ进程；免疫组化结果显示，与 ３×Ｔｇ组相比，ＩＬ组和 ＩＨ组小鼠后脑组织中 ｐＴａｕ２３１蛋白的阳性表达减 少（Ｐ＜００５）；分子对接显示 ＩＳＬ与 ＮＬＲＰ３有较好的结合能力；蛋白免疫印记结果显示，与 ３×Ｔｇ组相比，ＩＬ组 和 ＩＨ组小鼠海马体内 ＮＬＲＰ３、ｃｌｅａｖｅｄＣａｓｐａｓｅ１、Ｃａｓｐａｓｅ１、ＩＬ１β、ＩＬ１８、ｐＴａｕＴ２３１及 ｐＴａｕＳ３９６蛋白的表达量 均显著下降（Ｐ＜００５）。结论 ＩＳＬ可有效改善 ＡＤ小鼠认知功能障碍，其机制可能与 ＩＳＬ抑制 ＮＬＲＰ３活性、逆 转 Ｔａｕ过度磷酸化有关。

摘要：［摘 要］目的 探讨大黄素８ＯβＤ葡萄糖苷（Ｅ８Ｇ）对 Ｍ１型巨噬细胞极化和急性肝损伤（ＡＬＩ）的影响。 方法 体内采用脂多糖（ＬＰＳ）复制 Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠 ＡＬＩ模型，使用 Ｅ８Ｇ（００８和 ０１６ｍｇ／ｇ）进行干预；采用试剂 盒检测谷草转氨酶（ＡＳＴ）、谷丙转氨酶（ＡＬＴ）水平，酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定血清中检测白细胞介素６ （ＩＬ６）、白细胞介素１β（ＩＬ１β）、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα），苏木精伊红（Ｈ＆Ｅ）观察肝组织形态学变化；体外采 用 ＬＰＳ建立 Ｍ１型巨噬细胞极化模型，使用 Ｅ８Ｇ（２０和 ４０μｍｏｌ／Ｌ）进行干预；通过 ＣＣＫ８法检测细胞活力，ＥＬＩＳＡ 测定 ＩＬ６、ＩＬ１β和 ＴＮＦα分泌水平，实时荧光定量 ＰＣＲ（ＲＴｑＰＣＲ）测定 Ｉｌ６、Ｉｌ１ｂ和 Ｔｎｆ转录水平。结果 体内 实验显示，Ｅ８Ｇ干预进一步升高 ＡＬＩ小鼠血清 ＡＳＴ、ＡＬＴ及 ＩＬ６、ＴＮＦα、ＩＬ１β水平（Ｐ＜００５），加重肝组织病理 损伤。体外实验显示，Ｅ８Ｇ可上调 Ｍ１型巨噬细胞的炎症因子分泌与转录水平（Ｐ＜００５）。结论 Ｅ８Ｇ可能通 过促进 Ｍ１型巨噬细胞极化、放大炎症反应，进而加剧 ＬＰＳ诱导的小鼠 ＡＬＩ。

摘要：［摘 要］目的 探讨鱼藤素调节 ＲｈｏＡ／ＲＯＣＫ１通路对结直肠癌（ＣＲＣ）细胞增殖、迁移和侵袭的影响。 方法 采用 ＣＣＫ８法筛选鱼藤素最佳作用浓度，将 ＳＷ６２０细胞随机分为空白对照组、溶剂对照组、鱼藤素组、 ｐｃＤＮＡ组、ｐｃＤＮＡＲｈｏＡ组及鱼藤素 ＋ｐｃＤＮＡＲｈｏＡ组，使用鱼藤素和空载、ＲｈｏＡ过表达质粒分组干预后，Ｗｅｓｔ ｅｒｎｂｌｏｔ检测蛋白表达；Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ和划痕试验检测细胞侵袭、迁移；ＣＣＫ８法和克隆形成实验检测细胞增殖，制备 ＳＷ６２０移植瘤裸鼠，按同样分组干预后测定移植瘤瘤体质量与体积，免疫组化染色检测 Ｋｉ６７、Ｖｉｍｅｎｔｉｎ、Ｅｃａｄｈｅｒ ｉｎ表达，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测蛋白表达。结果 鱼藤素组较空白对照组 ＲｈｏＡ、ＲＯＣＫ１、Ｖｉｍｅｎｔｉｎ蛋白表达、细胞侵袭 数、迁移率、细胞活力与集落数、移植瘤 Ｋｉ６７阳性率、瘤体质量与体积、移植瘤 Ｖｉｍｅｎｔｉｎ阳性率与 ＲｈｏＡ、ＲＯＣＫ１ 蛋白表达降低（Ｐ＜００５），细胞 Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ蛋白表达、移植瘤 Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ阳性率升高（Ｐ＜００５），ｐｃＤＮＡＲｈｏＡ组 各指标变化趋势与鱼藤素组相反；相比鱼藤素组，鱼藤素 ＋ｐｃＤＮＡＲｈｏＡ组上述指标均逆转。结论 鱼藤素对 ＣＲＣ细胞增殖、迁移和侵袭的抑制可能是通过抑制 ＲｈｏＡ／ＲＯＣＫ１通路实现的。

摘要：［摘 要］目的 探究水疱性口炎病毒（ＶＳＶ）对三阴性乳腺癌抗肿瘤活性机制。方法 通过 ＧＥＰＩＡ２数据库 分析 ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ１／ＢＡＤ信号通路相关基因在乳腺癌中的差异表达，ＺＤＯＣＫ对接技术分析 ＶＳＶ的 Ｇ蛋白与 ＰＩ３Ｋ、 ＡＫＴ１、ＢＣＬ２、ＢＡＸ及 Ｃａｓｐａｓｅ３的亲和程度；ＣＣＫ８法检测 ＶＳＶ对小鼠乳腺腺癌细胞（４Ｔ１）存活率的影响， ＴＵＮＥＬ染色检测 ＶＳＶ干预后 ４Ｔ１细胞凋亡情况；以 ４Ｔ１细胞构建三阴性乳腺癌小鼠模型，分为对照组（ＰＢＳ）、 阳性药物组（盐酸阿霉素）、ＶＳＶ瘤内注射组（ＶＳＶＩＴ）、ＶＳＶ静脉注射组（ＶＳＶＩＶ），采用动物活体成像仪检测肿 瘤体积增长，ＨＥ染色检测肿瘤、肺组织病理变化，ｑＲＴＰＣＲ检测凋亡基因（ＢＡＸ、ＢＣＬ２）的表达，免疫组化法检 测肿瘤中凋亡相关蛋白 ＢＡＸ、ＢＣＬ２的表达水平。结果 在乳腺癌中 ＰＩ３Ｋ、ＡＫＴ１、ＢＡＤ、ＢＡＸ、Ｃａｓｐａｓｅ３的表达 均高于癌旁组织；ＶＳＶ的 Ｇ蛋白与 ＰＩ３Ｋ、ＡＫＴ１、ＢＣＬ２、ＢＡＸ、Ｃａｓｐａｓｅ３的最优模型的结合能从 －６６９ｋＪ／ｍｏｌ到 －１００８３ｋＪ／ｍｏｌ；ＶＳＶ干预后，４Ｔ１细胞凋亡增加；与对照组小鼠相比，ＶＳＶＩＴ组、ＶＳＶＩＶ组的小鼠肿瘤体积生 长显著减缓；ＶＳＶＩＴ组小鼠生存期有所延长、脾指数显著降低；与对照组和 ＶＳＶＩＶ组相比，ＶＳＶＩＴ组肿瘤组织 中 ＢＡＸ的 ｍＲＮＡ相对表达水平显著上调，ＢＣＬ２的 ｍＲＮＡ相对表达水平显著下调，肿瘤组织中 ＢＡＸ蛋白表达 显著上调，ＢＣＬ２蛋白表达显著下调。结论 ＶＳＶ具有延缓三阴性乳腺癌肿瘤体积生长的作用，且体内瘤内注 射的效果更好，这可能与其诱导肿瘤细胞凋亡有关。

摘要：［摘 要］目的 探讨窄谱中波紫外线（ＮＢＵＶＢ）通过短波敏感视蛋白 １（ＯＰＮ１ＳＷ）调控人角质形成细胞分化 与增殖的分子机制。方法 取对数期人角质形成细胞系（ＨａＣａＴ），采用细胞增殖毒性检测试剂盒（ＣＣＫ８）法分 别检测对照组及 １００、２００、３００、４００ｍＪ／ｃｍ２ ＮＢＵＶＢ照射组以确定 ＮＢＵＶＢ安全照射剂量；采用蛋白印迹（Ｗｅｓｔ ｅｒｎｂｌｏｔ）、实时荧光定量 ＰＣＲ（ＲＴｑＰＣＲ）及 ５乙炔基２＇脱氧尿苷（ＥｄＵ）增殖检测法检测 ＮＢＵＶＢ照射及 ＯＰＮ１ＳＷ过表达对角蛋白 １（ＫＲＴ１）、ＫＲＴ１０及细胞周期蛋白依赖性激酶 １（ＣＤＫ１）、细胞周期蛋白 Ｄ１（Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１）的影响，免疫荧光染色观察 ＯＰＮ１ＳＷ定位；通过转录组测序分析 ＯＰＮ１ＳＷ过表达后的差异基因及富集通路； 采用钙成像技术监测细胞内钙离子信号变化；最后在白细胞介素１７Ａ（ＩＬ１７Ａ）、白细胞介素２２（ＩＬ２２）、抑癌蛋 白 Ｍ（ＯＳＭ）、白细胞介素１α（ＩＬ１α）和肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）组成的细胞因子混合物（Ｍ５）诱导的银屑病样 炎症模型中，观察 ＯＰＮ１ＳＷ 过表达对分化障碍的逆转作用。结果 与对照组相比，２００ｍＪ／ｃｍ２ ＮＢＵＶＢ上调 ＨａＣａＴ细胞中 ＯＰＮ１ＳＷ表达的同时上调 ＫＲＴ１和 ＫＲＴ１０表达、下调 ＣＤＫ１、ＣｙｃｌｉｎＤ１表达及抑制细胞增殖（Ｐ＜ ００５）；ＯＰＮ１ＳＷ定位于细胞膜和细胞质；与空载体对照组相比，过表达 ＯＰＮ１ＳＷ同样促进分化并抑制增殖（Ｐ＜ ００５）；转录组分析显示，ＯＰＮ１ＳＷ过表达富集表皮发育、细胞分化及离子通道活性等通路；ＮＢＵＶＢ诱导细胞内 钙离子瞬时增加，ＯＰＮ１ＳＷ过表达增强此效应；在银屑病炎症模型中，ＯＰＮ１ＳＷ 过表达逆转了 Ｍ５诱导的 ＫＲＴ１ 和 ＫＲＴ１０下调。结论 ＯＰＮ１ＳＷ 可促进人角质形成细胞分化、抑制增殖，其机制可能与感知 ＮＢＵＶＢ并激活钙 信号有关。

摘要：［摘 要］目的 研究抗血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）药物阿柏西普在大鼠角膜移植模型中对角膜新生血管 （ＣＮＶ）生长的抑制作用。方法 ２４只 ＳＤ雄性大鼠进行穿透性角膜移植术后，随机分为空白组（术后 １周行结 膜下注射生理盐水）、对照组（术前 １周行阿柏西普结膜下注射）和实验组（术后 １周行阿柏西普结膜下注射）， 术后第 １、２周及第 １、２、３月使用裂隙灯观察角膜透明度及水肿度，计算 ＣＮＶ面积；术后 １、３月行共聚焦显微镜 检测 ＣＮＶ管径，取角膜行苏木精伊红染色（ＨＥ）及 ＶＥＧＦＲ免疫荧光染色。结果 术后第 ２周、第 １月时，对照 组和实验组的角膜透明度及水肿度评分均低于空白组（Ｐ＜００５）；术后第 ２周、第 １、２月，两组 ＣＮＶ面积较空白 组缩小（Ｐ＜００５）；术后 １月，两组 ＣＮＶ管径小于空白组，术后 ３月管径空白组 ＞实验组 ＞对照组（Ｐ＜００５）； 术后 １月 ＶＥＧＦＲ表达为空白组 ＞实验组 ＞对照组（Ｐ＜００５），术后 ３月对照组 ＶＥＧＦＲ表达低于空白组和实验 组（Ｐ＜００５）。结论 阿柏西普可抑制大鼠角膜移植术后 ＣＮＶ的生成，减轻角膜移植免疫排斥反应，但单次给 药作用时间短暂。

摘要：［摘 要］目的 探讨铁死亡诱导剂 Ｅｒａｓｔｉｎ联合程序性死亡蛋白１（ＰＤ１）抑制剂（ａｎｔｉＰＤ１）对 ＭＣ３８ＯＶＡ结 直肠癌的抗肿瘤作用及其可能机制。方法 ２０只 ＭＣ３８ＯＶＡ结直肠癌荷瘤小鼠随机均分为对照组（２００μＬ ＰＢＳ）、Ｅｒａｓｔｉｎ组（２０ｍｇ／ｋｇＥｒａｓｔｉｎ）、ａｎｔｉＰＤ１组（２００μｇａｎｔｉＰＤ１）、Ｅｒａｓｔｉｎ＋ａｎｔｉＰＤ１组，连续 １４ｄ观察荷瘤小 鼠肿瘤生长情况，苏木精伊红（ＨＥ）法观察肿瘤组织病理变化，Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８染色检测肿瘤组织细胞凋亡情况， 免疫荧光法检测肿瘤组织 ＣＤ３１、缺氧诱导因子１α（ＨＩＦ１α）蛋白表达；取 ＭＣ３８ＯＶＡ肿瘤细胞，设置对照组 （１０μＬＰＢＳ）、Ｅｒａｓｔｉｎ组（４０ｍｇ／ＬＥｒａｓｔｉｎ）、ａｎｔｉＰＤ１组（２５ｍｇ／ＬａｎｔｉＰＤ１）、Ｅｒａｓｔｉｎ＋ａｎｔｉＰＤ１组，二氢乙锭 （ＤＨＥ）法检测各组细胞活性氧（ＲＯＳ）水平，酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）法检测各组细胞 Ｆｅ２＋、丙二醛（ＭＤＡ）、 谷胱甘肽（ＧＳＨ）水平，将各组处理后的 ＭＣ３８ＯＶＡ细胞与 ＣＤ８＋Ｔ细胞按预设效靶比共培养，采用流式细胞仪检 测 ＣＤ８＋Ｔ细胞的杀伤能力。结果 与对照组比较，Ｅｒａｓｔｉｎ组、ａｎｔｉＰＤ１组、Ｅｒａｓｔｉｎ＋ａｎｔｉＰＤ１组小鼠肿瘤体积、 重量及 ＣＤ３１阳性率降低，细胞凋亡率升高（Ｐ＜００５），且 Ｅｒａｓｔｉｎ＋ａｎｔｉＰＤ１组抑瘤效果最强（Ｐ＜００５）；体外 实验显示，与对照组比较，Ｅｒａｓｔｉｎ组、Ｅｒａｓｔｉｎ＋ａｎｔｉＰＤ１组细胞 Ｆｅ２＋、ＭＤＡ水平升高，ＧＳＨ水平降低（Ｐ＜００５）； 在效应细胞 ∶靶细胞（Ｅ∶Ｔ）＝１∶１、１∶２条件下，与空白组比较，Ｅｒａｓｔｉｎ处理组、ａｎｔｉＰＤ１处理组和联合处理组 ＣＤ８＋Ｔ细胞杀伤效果增加（Ｐ＜００５），且联合处理组 ＭＣ３８ＯＶＡ细胞铁死亡及 ＣＤ８＋Ｔ细胞抗肿瘤活性最强 （Ｐ＜００５）。结论 Ｅｒａｓｔｉｎ联合 ＰＤ１抑制剂可协同诱导结直肠癌凋亡并增强 ＣＤ８＋Ｔ细胞抗肿瘤活性，其机制 可能与促进氧化应激、铁代谢失衡及抑制肿瘤血管生成有关。